1、建議使用保護(hù)柱,防止顆粒進(jìn)入柱內(nèi)造成堵塞;
2、建議選擇合適pH范圍的色譜柱,避免填料溶劑老化;
3、緩沖鹽的正確使用:
緩沖鹽使用不當(dāng)會(huì)沉淀,堵塞篩板和填料,使填料變硬,增加柱壓,阻礙基質(zhì)上鍵合相的碳鏈自由伸展,降低色譜柱的保留能力,降低柱效率并縮短其使用壽命。緩沖鹽分離后很難去除。因此,正確使用緩沖鹽對(duì)于延長色譜柱的使用壽命非常重要。
戴安液相色譜柱使用前過渡,使用后沖洗
1、等度條件:用過渡流動(dòng)相制備前后柱體積不少于20-30柱,或制備后用過渡流動(dòng)相以1.0ml/min(根據(jù)色譜柱規(guī)格調(diào)整)洗柱體積過夜;
2、梯度條件:制備前,用與初始流動(dòng)相相同的流動(dòng)相組成,以工作流速洗滌色譜柱不少于20-30柱體積;配制后用過渡流動(dòng)相洗色譜柱不少于20-30柱體積,梯度盡量平緩,避免緩沖鹽沉淀;
3、過渡型流動(dòng)相:有機(jī)相和水相的比例與分析流動(dòng)相中兩相的比例一致,或者水相的比例高于分析流動(dòng)相,*沒有緩沖鹽;
強(qiáng)保留物質(zhì)在戴安液相色譜柱中的積累是一個(gè)緩慢的過程,導(dǎo)致峰展寬和拖尾,柱效下降,保留時(shí)間改變,柱壓升高;很難判斷復(fù)雜樣品中是否存在強(qiáng)滯留物質(zhì),因此必須杜絕所有這些方法。每天分析完畢后,用純甲醇或乙腈反洗色譜柱20柱體積以上。
戴安液相色譜柱清洗方法:
1、沒有使用緩沖鹽。每天使用后,用純甲醇或純乙腈的柱體積在20以上;
2、上述方法除去緩沖鹽后,用純甲醇或純乙腈反洗柱子20柱體積以上;
3、處理方法:水→乙腈→異丙醇(或氯仿)→乙腈→水,每步洗滌不少于30柱體積。
注意:不要輕易打開柱頭,因?yàn)橹^一旦打開,就很難恢復(fù)到新柱的水平。因柱頭開啟造成的檢測(cè)后果由客戶負(fù)責(zé)。