淺析生物磁珠分離技術(shù)原理
發(fā)布日期:2022-11-23 瀏覽次數(shù):784
生物磁珠分離技術(shù)借助生物磁珠捕獲樣品中靶物質(zhì),通過(guò)生物磁珠在磁場(chǎng)中的運(yùn)動(dòng)使靶物質(zhì)(如病原微生物)分離。生物磁珠由磁性載體和免疫配基結(jié)合而成。天然磁性材料可從磁性細(xì)菌中分離獲得,如從磁性細(xì)菌體內(nèi)提取納米生物磁珠,在其表面聯(lián)上大腸桿菌抗體后用于分離大腸桿菌,但該方法成本較高,因而多采用工業(yè)方法制備。1979年,研發(fā)出了能生產(chǎn)直徑1.5~100?m、結(jié)構(gòu)對(duì)稱的多聚體超順磁性微球(簡(jiǎn)稱“磁珠”)的技術(shù)。該技術(shù)生產(chǎn)的磁珠僅在磁場(chǎng)中表現(xiàn)出磁性,因此向樣品中加入磁珠時(shí),磁珠分散并能與樣品充分混合;當(dāng)在試管一側(cè)添加強(qiáng)磁場(chǎng)時(shí),生物磁珠能迅速發(fā)生力學(xué)遷移并吸附在靠近磁場(chǎng)的試管內(nèi)壁,移除樣品后即可將磁珠分離。
免疫配基包被于磁珠外表面,主要包括一抗、二抗和蛋白質(zhì)A/G。包被一抗的生物磁珠可直接使用,方便快捷,但僅適用于特定靶物質(zhì)的分離;包被二抗或蛋白質(zhì)的生物磁珠必須再包被一抗才能捕獲相應(yīng)靶物質(zhì),但其能與多種相應(yīng)的一抗結(jié)合,靈活性強(qiáng)。
生物磁珠表面的特異抗體能與樣品中的靶物質(zhì)(具有相應(yīng)的表面抗原)發(fā)生免疫反應(yīng),形成生物磁珠—靶物質(zhì)復(fù)合物。在外加磁場(chǎng)中,生物磁珠 一靶物質(zhì)復(fù)合物被吸附并滯留在磁場(chǎng)中,而無(wú)相應(yīng)表面抗原的物質(zhì)由于不能與生物磁珠表面的特異抗體結(jié)合,沒(méi)有磁性,不能在磁場(chǎng)中停留,從而可分離靶物質(zhì)。