戴安離子色譜主要由貯液瓶、泵、進(jìn)樣器、柱、柱溫箱、檢測器、數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)組成。對于整個(gè)系統(tǒng)而言,柱子、泵和檢測器是核心部件,同時(shí)也是容易出事故的主要場所。
常見問題及解決方法
1.針對柱壓問題
柱壓問題是使用高效液相色譜過程中需要密切注意的地方,柱壓的穩(wěn)定與色譜圖峰形的好壞、柱效、分離效果及保留時(shí)間等密切相關(guān)。所謂柱壓穩(wěn)定并不是指壓力值穩(wěn)定于一個(gè)恒定值,而是指壓力波動范圍在50PSI之間。壓力過高、過低及波動較大都屬于柱壓問題,但柱壓的高低與色譜柱的種類、品牌、液相系統(tǒng)本身及使用的流動相種類相聯(lián)系。值得注意的是在使用梯度洗脫時(shí),進(jìn)柱壓的平穩(wěn)緩慢的變化是允許的。
在實(shí)際應(yīng)用中柱壓過高可從以下幾個(gè)方面來考慮。首先考慮柱子是否被堵,此時(shí)可更換一根新柱子進(jìn)行檢測。
2.針對保留時(shí)間漂移的問題
保留時(shí)間的改變是很多液相色譜使用者常碰到的問題,其包括了保留時(shí)間增大和減小。它的產(chǎn)生與很多原因有關(guān)。
3.針對異常色譜峰問題
異常的色譜峰指的是色譜圖中無峰或出現(xiàn)負(fù)峰、寬峰、雙峰、肩峰、峰形不對稱等情況。
戴安離子色譜的保養(yǎng)
1.HPLC的日常操作條件
工作溫度10~30℃;相對濕度<80%;最好是恒溫、恒濕,遠(yuǎn)離高電干擾、高振動設(shè)備。
2.泵的保養(yǎng)
使用流動相盡量要清潔;進(jìn)液處的沙芯過濾頭要經(jīng)常清洗;流動相交換時(shí)要防止沉淀;避免泵內(nèi)堵塞或有氣泡。
3.進(jìn)樣器的保養(yǎng)
每次分析結(jié)束后,要反復(fù)沖洗進(jìn)樣口,防止樣品的交叉污染。
4.柱的保養(yǎng)
柱子在任何情況下不能碰撞、彎曲或強(qiáng)烈震動;當(dāng)柱子和色譜儀連接時(shí),閥件或管路一定要清洗干凈;要注意流動相的脫氣;避免使用高粘度的溶劑作為流動相;進(jìn)樣樣品要提純;嚴(yán)格控制進(jìn)樣量;每天分析工作結(jié)束后,要清洗進(jìn)樣閥中殘留的樣品;每天分析測定結(jié)束后,都要用適當(dāng)?shù)娜軇﹣砬逑粗?;若分析柱長期不使用,應(yīng)用適當(dāng)有機(jī)溶劑保存并封閉。
5.檢測器(UV)的保養(yǎng)
戴安離子色譜紫外燈的保養(yǎng)要在分析前、柱平衡得差不多時(shí),打開檢測器;在分析完成后,馬上關(guān)閉檢測器。同時(shí)樣品池要保養(yǎng)。