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菌落總數(shù)即為食品檢樣經(jīng)過處理,在一定條件下(如培養(yǎng)基、培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時(shí)間等)培養(yǎng)后,所得每g(mL)檢樣中形成的微生物菌落總數(shù)。菌落總數(shù)主要作為判定食品被污染程度的標(biāo)志,也可以應(yīng)用這一方法觀察細(xì)菌在食品中繁殖動(dòng)態(tài),以便對(duì)被檢樣品進(jìn)行衛(wèi)生學(xué)評(píng)價(jià)時(shí)提供依據(jù)。
每種細(xì)菌都有它一定的生理特性,培養(yǎng)時(shí)應(yīng)用不同的營養(yǎng)條件及其他生理?xiàng)l件(如溫度、培養(yǎng)時(shí)間、pH、需氧性質(zhì)等)去滿足其要求才能將各種細(xì)菌都培養(yǎng)出來。但在實(shí)際工作中,一般都只用一種常用的方法。細(xì)菌菌落總數(shù)的測定,所得結(jié)果,只包括一群能在營養(yǎng)瓊脂上發(fā)育的嗜中溫性需氧菌的菌落總數(shù)。菌落總數(shù)并不表示樣品中實(shí)際存在的所有細(xì)菌總數(shù),菌落總數(shù)并不能區(qū)分其中細(xì)菌的種類,所以有時(shí)被稱為雜菌數(shù),需氧菌數(shù)等。
菌落總數(shù)檢測一般步驟為:
采樣 — 樣品制備與稀釋 — 倒平板 — 涂布平板 — 倒置培養(yǎng) — 菌落計(jì)數(shù) — 計(jì)算菌落總數(shù)
在常見的菌落檢測過程中,有哪些產(chǎn)品是可以使用呢?我們?cè)诖耸崂硪幌隆?/p>
樣品制備,需要對(duì)樣品進(jìn)行均質(zhì),根據(jù)需要檢測的樣品不同。應(yīng)用不同的均質(zhì)設(shè)備,如均質(zhì)機(jī),拍打式均質(zhì)器等;
樣品的稀釋,國標(biāo)中采用1:10的十倍稀釋方法,各種手動(dòng)精密移液器,瓶口分液器,移液管控制器為液體操作提供了保證。
倒平板,使用的培養(yǎng)基為含有瓊脂的固體培養(yǎng)基。培養(yǎng)基在配備的過程中需要經(jīng)過煮沸和保溫的步驟。加熱磁力攪拌器,可極大節(jié)約培養(yǎng)基制備時(shí)間。在倒平板之前,需要恒溫培養(yǎng)基46±1 ℃, 恒溫水浴鍋,可以提供的溫度控制和恒溫條件;
涂布平板,培養(yǎng)基在培養(yǎng)皿中冷卻成固態(tài)之后,將稀釋后的樣品用移液器取1mL,滴到培養(yǎng)基表面,用涂布棒涂勻。有的培養(yǎng)皿轉(zhuǎn)盤,可以有效的將樣品液均勻的涂布在培養(yǎng)基表面。
倒置培養(yǎng),將涂布完畢的平板,放入恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng),一般培養(yǎng)時(shí)間約為48h。各種規(guī)格的臺(tái)式及落地式培養(yǎng)箱,非常適合規(guī)范化培養(yǎng)要求。
菌落數(shù)計(jì)算,經(jīng)過48小時(shí)的培養(yǎng)之后,在培養(yǎng)基表面會(huì)長出菌斑,每個(gè)菌斑代表一個(gè)微生物。一般在培養(yǎng)皿中菌落數(shù)為30-300個(gè)之間,為有效菌落數(shù)。低于30個(gè),會(huì)因?yàn)闃颖玖坎蛔?,隨機(jī)性大;超過300個(gè),會(huì)因?yàn)榫鋽?shù)太多,過于密集產(chǎn)生菌斑重疊等現(xiàn)象,不利于準(zhǔn)確計(jì)數(shù)。菌落計(jì)數(shù)器,是帶有非閃爍式環(huán)形光源,放大鏡,壓力傳感器,計(jì)數(shù)筆等,可以讓使用者輕松計(jì)數(shù)。
計(jì)算菌落總數(shù),培養(yǎng)皿中的菌落數(shù)需要通過公式換算。 菌落計(jì)數(shù)器配套軟件可以直接通過壓力傳感器進(jìn)行培養(yǎng)皿中菌落計(jì)數(shù),通過軟件內(nèi)嵌程序直接計(jì)算出被檢測樣品中菌落總數(shù)。